Окинавский пастушок: осеменение замороженной спермой дало эмбрион, развивавшийся до 21-го дня
Учёные заморозили сперму исчезающего окинавского пастушка и осеменили самку: один эмбрион развивался до 21-го дня и погиб до вылупления. Метод может помочь сохранить генетические ресурсы.
Исследователи из Осакского столичного университета сообщили об искусственном осеменении окинавского пастушка (Hypotaenidia okinawae) замороженно-размороженной спермой, следует из статьи на nature.com. Вид обитает только на севере острова Окинава (Япония) и внесён в список исчезающих, его численность составляет примерно 1 500 особей. Один эмбрион нормально развивался до 21-го дня после откладки яйца, затем погиб nature.com
nature.comnature.comОткрыть источник ↗.
Численность сокращается из-за гибели птиц на дорогах и хищничества одичавших кошек, собак и мангустов. По мнению авторов, репродуктивные технологии — эффективный метод сохранения вида вне природной среды (ex situ), поскольку помогают увеличить размер популяции.
Заморозка и анализ спермы
Эякулят собирали четыре раза от одного самца (№ 127), объёмом 20, 20, 15 и 5 мкл. Сперму заморозили в растворе с N-метилацетамидом в качестве криопротектора. По данным авторов, сперму, замороженную с этим веществом, можно использовать без его удаления перед осеменением.
Образцы медленно размораживали в воде при 4 °C и анализировали на системе компьютерного анализа спермы. Подвижность замороженной спермы в образцах 1–3 составила 42,2 %, 46,1 % и 25,1 %, тогда как у свежей спермы образцов 1 и 2 — 61,3 % и 62,6 %. Нормальность мембран сперматозоидов в образцах 1–3 составила 78,8 %, 62,0 % и 67,3 % nature.com
nature.comnature.comОткрыть источник ↗.
Сперму четырёх других особей для осеменения не использовали, чтобы сохранить генетическое разнообразие. Её хранят в жидком азоте для будущих попыток.
Осеменение и эмбрион
Искусственное осеменение проводили три раза. В первой и второй попытках самка снесла яйца: в первой яйцо было неоплодотворённым, во второй — оплодотворённым. В третьей попытке кладки не было.
Оплодотворённое яйцо поместили в инкубатор. Эмбрион не смог пробить скорлупу в назначенный день вылупления (21-е сутки) и погиб. Затем его извлекли из яйца для генетического анализа nature.com
nature.comnature.comОткрыть источник ↗.
Ранее самку осеменяли свежей спермой другого самца (№ 152), поэтому провели тест на отцовство. Анализ длины фрагментов показал, что у самца № 127 и эмбриона одинаковые аллели, то есть эмбрион получен от замороженной спермы. Авторы заключают, что замороженная сперма окинавского пастушка потенциально способна оплодотворять яйцеклетки при искусственном осеменении, а протокол может пригодиться и для других исчезающих видов птиц.
